抗生素是一種生理活性物質(zhì),它對(duì)生命現(xiàn)象很敏感,抗生素的劑量常用重量和效價(jià)來(lái)表示?;瘜W(xué)合成和半合成的抗菌藥物都以重量表示,生物合成的抗生素以效價(jià)表示,并同時(shí)注明與效價(jià)相對(duì)應(yīng)的重量。 效價(jià)是以抗菌效能(活性部分)作為衡量的標(biāo)準(zhǔn),因此,效價(jià)的高低是衡量抗生素質(zhì)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。效價(jià)以"單位"(U)來(lái)表示。
抗生素效價(jià)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程
(1)取無(wú)菌平皿,加入20ml底層培養(yǎng)基,凝固后作為底層。
(2)用滅菌生理鹽水將短小芽胞桿菌的芽胞懸液稀釋至一定濃度以能得到清晰的抑菌圈,且標(biāo)準(zhǔn)品高濃度所得抑菌圈直徑在18~22mm為基準(zhǔn)。用無(wú)菌吸管吸取1ml芽胞懸液,加入到200ml恒溫于50℃的上層培養(yǎng)基中搖勻,迅速以無(wú)菌吸管吸取5ml,注入到底層培養(yǎng)基上,鋪平待凝。
(3)在平板底部四邊,分別對(duì)角注明"SH"、"SL" 和"UH"、"UL"標(biāo)記。
(4)鑷子火焰滅菌3次,然后夾取4個(gè)牛津杯垂直放置在平板中標(biāo)志附近(注:勿使鋼管陷入培養(yǎng)基內(nèi),各小杯之間盡量等距)。
(5)以無(wú)菌滴管分別在每個(gè)牛津杯內(nèi)加入相應(yīng)的抗生素溶液至滿但不溢出管外,且四杯內(nèi)液面高度相同,蓋上平皿蓋,靜置30分鐘。
(6)將平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16~18 h,量取各抑菌圈直徑(SH、SL、UH、UL),以毫米為單位,誤差不超過(guò)0.1mm。
(7)計(jì)算抗生素效價(jià)
(8)查放線圖計(jì)算抗生素效價(jià)